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數(shù)顯可見分光光度計是一種常用的光譜分析儀器
更新時間:2023-04-18 點擊次數(shù):1087次
  數(shù)顯可見分光光度計是一種常用的光譜分析儀器。其主要原理是在選擇性吸收現(xiàn)象基礎(chǔ)上測量物質(zhì)的濃度,該原理也被稱為比色法。經(jīng)過樣品的光線受到吸收后,產(chǎn)生一個比原來較弱的帶有物質(zhì)色彩特征的光譜。可見光區(qū)域的波長范圍通常是400-800nm,因此數(shù)顯可見分光光度計使用濾波片選擇準(zhǔn)確的波長范圍,將寬譜默認為單一波長,即所選范圍內(nèi)的某個波長進行測量。適用于化學(xué)、生物、食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域。其主要用途包括測定水溶液中某種離子、有機化合物、蛋白質(zhì)、肽類以及酶的活性等。
 
  樣品中物質(zhì)吸收的程度與其濃度成正比,數(shù)顯可見分光光度計通過對透射光和進入樣品前的光強進行比較,測定了樣品中物質(zhì)的吸光度。高濃度樣品的吸光度較大,而低濃度樣品的吸光度則較小。主要由光源、狹縫、棱鏡(或光柵)、濾波片、檢測器和顯示器組成。光源產(chǎn)生可見光,并將其發(fā)射至狹縫處。狹縫起到減少入射的光束寬度的作用,使它們成為平行的光線。由棱鏡(或光柵)引導(dǎo)的光束,被分散成多條波長不同的光譜,形成一個彩色圖像,接著選擇合適的濾波片進行過濾,只留下與該物質(zhì)吸收峰匹配的波長。光線經(jīng)過樣品(通常放置在立方體玻璃池中),吸收一部分后穿過檢測器,檢測器轉(zhuǎn)換為電信號。電信號被顯示器解釋和表示,并通過計算濃度值來確定樣品中要測定物質(zhì)的含量。
 
  使用數(shù)顯可見分光光度計測量樣品的方法主要包括以下幾個步驟:
 
  1.打開儀器電源,按下預(yù)熱鍵。一般情況下,預(yù)熱時間為15-30分鐘,預(yù)熱完成后屏幕上會顯示出“OK”提示。
 
  2.將試管架空載入儀器中,關(guān)閉光源調(diào)節(jié)旋鈕并將光程旋鈕調(diào)成大值。此時零位指示燈亮起,表示已進入調(diào)零狀態(tài)。然后打開光源調(diào)節(jié)旋鈕,逐漸調(diào)節(jié)到合適的光強度大小,并按下ZERO鍵復(fù)位。
 
  3.將待測樣品放入比色皿中,并放入試管架中,打開光源和檢波室開關(guān)。根據(jù)需要選擇吸光度或所需檢測波長,并轉(zhuǎn)動光程旋鈕以使測量結(jié)果好。
 
  4.當(dāng)示波器振蕩穩(wěn)定后,記錄示值即為該樣品的吸光度。如需多次測量同一樣品,請重新進行校零操作后再進行。
 
  5.使用完畢后應(yīng)及時清洗相關(guān)部件,避免交叉污染和對儀器造成損害。
 

數(shù)顯可見分光光度計

 

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